水處理采樣準(zhǔn)備

　　取樣器材：兩支50mL注射器(配合膜過濾法/濾膜法結(jié)果精度可以達(dá)到1cfu/50mL=0.02cfu/mL)棉簽一包

　　75%酒精一瓶（檢查有效期及開封日期）

　　戴口罩，一次性手套

　　取樣的核心：

　　1、取到的反滲水樣本跟管道里正常流動的反滲水一致，不能受到污染，同樣也不要有額外的消毒（殘留酒精）；2、取樣口處，透析用水從反滲水管道內(nèi)部到進(jìn)入采樣器皿的過程保持無菌（酒精消毒）或不影響檢測結(jié)果的反滲水管道內(nèi)壁環(huán)境（流動反滲水沖洗30秒）。采樣標(biāo)準(zhǔn)操作：1.采樣口內(nèi)部利用管路反滲水沖洗30秒；2.采樣口外部酒精消毒兩次待干；3.即可采樣，采樣時(shí)采樣的器皿不能接觸采樣口。因?yàn)槲覀內(nèi)涌跓o法開到較大流量沖洗，會弄得到處都是水，所以為了降低干擾，我院采樣：1.采樣口內(nèi)部利用管路反滲水沖洗30秒；2.采樣口內(nèi)外均用酒精消毒兩次待干；3.再次利用管路反滲水沖洗采樣口內(nèi)部30秒；4.采樣時(shí)采樣的器皿不能接觸采樣口。另:（2019版SOP征求意見稿）要求沖洗60秒，并75%酒精消毒外表面3次后待干取樣。透析液采樣：取樣的核心：1、取樣得到的透析液，必須與正常工作時(shí)進(jìn)入透析器的透析液完全一樣，不能有污染或者額外的消毒；2、從透析液供給管快速接頭密封圈之下的位置，隨著每次涌出透析液時(shí)采樣，保證采到的透析液是管路里新涌出的，未經(jīng)過密封圈等污染源（因?yàn)閷?shí)際工作時(shí)，透析液也不經(jīng)過密封圈）；3、當(dāng)需要大量取樣時(shí)，難以從透析液供給管快速接頭取夠樣品，可以考慮利用透析器的無菌環(huán)境，從透析器透析液出口端采樣。采樣部位：1.透析液即將進(jìn)入透析器的快速接頭處（標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可的取樣部位）2.安裝上無菌的一次性透析器，從透析器的透析液出口端取樣（大量取樣時(shí)可考慮）注意：機(jī)器自帶機(jī)械取樣口嚴(yán)禁進(jìn)行微生物相關(guān)的取樣，某些透析機(jī)管路上可以重復(fù)使用的類似給病人輸藥的取樣口也不建議進(jìn)行微生物相關(guān)取樣。采樣方法：1、透析液即將進(jìn)入透析器的快速接頭處

　　?機(jī)器自檢完畢且管路預(yù)充完畢，膜內(nèi)膜外均已排氣完成，病人上機(jī)前；

　　?關(guān)閉透析液開關(guān)，從透析器上取下透析液供給管的快速接頭；

　　?保持快速接頭開口向上，打開透析液開關(guān)，讓透析液自然流出；

　　?在透析液涌出的時(shí)間，將取樣吸管或注射器插入快速接頭底部取樣；

　　?在透析液涌出的時(shí)間，進(jìn)行取樣。

　　注意：取樣部位必須在快速接頭底部，同時(shí)采樣過程不能碰到密封圈。我們50mL注射器還是從透析器即將進(jìn)入透析液的快速接頭處慢慢抽取的，但如果取幾百毫升或者幾升透析液，因?yàn)橛脮r(shí)過長，透析機(jī)會檢測到透析液通路不正常而發(fā)出各種警報(bào)，導(dǎo)致無法順利取樣。2、在難以按照第一種方法取樣時(shí)，可以考慮第二種取樣方法（專家共識但未列入標(biāo)準(zhǔn)）安裝上無菌的一次性透析器，從透析器的透析液出口端取樣。

　　?主要流程跟第一種相同，區(qū)別在于取樣位置；

　　?透析器膜外排氣完成后，病人上機(jī)前，關(guān)閉透析液開關(guān)，取下透析器透析液出口的快速接頭；

　　?將透析器傾斜45度打開透析液開關(guān)讓透析液自然流出；

　　?用已滅菌容器收集透析液。注意容器不能碰觸透析器的透析液出口處。

　　培養(yǎng)基要求:透析用水和透析液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，使用膜過濾法進(jìn)行培養(yǎng)（與內(nèi)鏡采樣的濾膜法基本相同），培養(yǎng)基宜選用胰化蛋白胨葡萄糖培養(yǎng)基（TGEA）、R2A營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（R2A），或其他確認(rèn)能提供相同結(jié)果的培養(yǎng)基，不能使用血瓊脂培養(yǎng)基和巧克力瓊脂培養(yǎng)基。